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現(xiàn)貨人凋亡誘導因子ELISA檢測試劑盒使用的實驗方案
更新時間:2012-09-19   點擊次數(shù):2271次

人凋亡誘導因子ELISA檢測試劑盒          

本試劑僅供研究使用     標本:血清或血漿

上海信然生物技術有限公司專業(yè)供應各種屬elisa試劑盒,食品檢測試劑盒,放免試劑盒,標準對照品,細胞株,提供免費代測服務,保證實驗結果客觀真實性。我公司對試劑盒質量100%保證,若存在質量問題,我們無條件包退換。若需要了解試劑盒的詳細信息,請::謝
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試驗原理:
    AIF試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知AIF濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將AIF和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中AIF的濃度呈比例關系。
 
自備材料
蒸餾水。
加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
振蕩器及磁力攪拌器等。

安全性
避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

人凋亡誘導因子ELISA檢測試劑盒 

操作注意事項
試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

樣品收集、處理及保存方法
血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

人凋亡誘導因子ELISA檢測試劑盒 

操作步驟
使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應孔內。
加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。
在450nm波長處測定各孔的OD值。

6號標準品以上的結果為非線性的,根據(jù)此標準曲線無法得到的結果。

試劑盒性能
1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990。
2. 特異性:不與其它細胞因子反應。
3. 重復性:板內、板間變異系數(shù)均小于10%。

人凋亡誘導因子ELISA檢測試劑盒 

結 果 判 斷 與 分 析
1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值

2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的AIF標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的AIF含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。

3、檢測值范圍:0-80ng/ml

4、敏感度: 0.1 ng/ml

Mouse IgG/APC 熒光素APC標記小鼠IgG(細胞流式同型對照) 0.1ml
Goat IgG/APC 熒光素APC標記羊IgG(細胞流式同型對照) 0.1ml
Rat IgG/APC 熒光素APC標記大鼠IgG(細胞流式同型對照) 0.1ml
Bovine IgG/APC 熒光素APC標記牛IgG 0.1ml
Bovine IgM/APC 熒光素APC標記牛IgM 0.1ml
MGMT (O6-methylguanine-DNA methyltransferase) O6甲基鳥嘌呤DNA甲基轉移酶抗體 0.1ml
MGMT (O6-methylguanine-DNA methyltransferase) O6甲基鳥嘌呤DNA甲基轉移酶抗體 0.2ml
MT(metallothionein) 金屬硫蛋白抗體 0.2ml
MGr1-Ag/37LRP(P37-kDa laminin receptor precursor)(NT) 層粘連蛋白受體1抗體(N端) 0.2ml
MTA1(Metastasis-associated 1) 腫瘤轉移相關蛋白1抗體 0.2ml
MGr1-Ag/37LRP(P37-kDa laminin receptor precursor)(CT) 層粘連蛋白受體1抗體(C端) 0.2ml
Myf6(Myogenic factor 6) 生肌調節(jié)因子6抗體 0.2ml
Guinea IgM/APC 熒光素APC標記豚鼠IgM 0.1ml
Horse IgG/APC 熒光素APC標記馬IgG 0.1ml
Horse IgM/APC 熒光素APC標記馬IgM 0.1ml
human IgG/APC 熒光素APC標記人IgG 0.1ml
human IgM/APC 熒光素APC標記人IgM 0.1ml
MICA(MHC class I polypeptide-related sequence A) 細胞應激分子抗體 0.2ml
Microsporidia 蜜蜂微孢子蟲蛋白抗體 0.2ml
Midnolin isoform Protein 1 中腦核仁蛋白1抗體 0.2ml
 

上海通蔚生物科技有限公司

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主營產(chǎn)品:ELISA檢測試劑盒,ELISA試劑盒,酶聯(lián)免疫試劑盒,人ELISA試劑盒,大鼠ELISA試劑盒,小鼠ELISA試劑盒,豚鼠ELISA試劑盒,兔ELISA試劑盒,羊ELISA試劑盒,牛ELISA試劑盒,雞ELISA試劑盒,鴨ELISA試劑盒

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