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抗原對(duì)于人ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的影響
更新時(shí)間:2013-10-29   點(diǎn)擊次數(shù):1131次

    抗原,是指能在體內(nèi)引起免疫反應(yīng)的物質(zhì);某一物質(zhì)能否成為抗原,首先是由它本身的某些性質(zhì)決定的。多抗取白免疫動(dòng)物的抗血清,制備較簡(jiǎn)單,但抗血清成分復(fù)雜,除含針對(duì)抗原(多個(gè)表位)的抗體外,還含有多種其他抗體,親和力和特異性相對(duì)要低于單抗,人ELISA試劑盒且制備周期長(zhǎng),批間差異較大。主要有3類,即自然抗原、人工合成抗原和基因重組抗原。抗原在ELISA試劑盒中應(yīng)用的抗原要求有較高的特異性、親和力和純度。
在使用雙單抗一步法時(shí),應(yīng)注意抗原過(guò)剩時(shí)的“鉤狀效應(yīng)”。而單抗僅針對(duì)抗體的單一表位,親和力和特異性均較多抗高,且制備技術(shù)成熟,產(chǎn)量大,批間差異小,但結(jié)合位點(diǎn)的單一也正是其弱點(diǎn)之所在,在雙抗體夾心法中,如包被和指示抗體使用同一單抗,則由于結(jié)合位點(diǎn)的缺乏,等閑造成假陰性結(jié)果。人ELISA試劑盒多為體外的蛋白、病菌等各類物質(zhì),椰油機(jī)體本身的,如自身免疫缺陷病癥會(huì)對(duì)自身產(chǎn)生免疫。

  抗原的純度不高,特異性不強(qiáng);合成抗原一般為多肽片段,缺乏天然抗原所具有的立體結(jié)構(gòu)表位,親和力不高,可能導(dǎo)致相應(yīng)表位的抗體漏檢:基因重組抗原具有安全、特異性強(qiáng)、親和力高、產(chǎn)量大等特點(diǎn),是一種比較理想的抗原,人ELISA試劑盒但其純化比較挫折。熒光和化學(xué)發(fā)光測(cè)定的敏感度均高于比色測(cè)定,標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍亦較比色反應(yīng)寬,測(cè)定效果優(yōu)于常用的比色ELISA試劑盒,抗體在ELISA試劑盒中應(yīng)用的抗體可分為多克隆抗體(多抗)和單克隆抗體(單抗)。

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